? ? ? ?上期推送，我們給大家介紹了CD161和LLT1，并且講述了CD161在NK細(xì)胞上的調(diào)控模式以及腫瘤微環(huán)境的巨大挑戰(zhàn)。本期，我們會(huì)接著帶來CD161成藥性的挑戰(zhàn)以及CD161在T細(xì)胞尤其是CD8+的T細(xì)胞的病理機(jī)制。 一、成藥性的挑戰(zhàn) ? ? ? ?考慮到以上困難，如果有CD161的研發(fā)管線，就非常值得借鑒，然而（圖9）：  ? 圖9 沒有公開信息表明，以CD161和LLT1為靶點(diǎn)的抗體，含有國際非專用名，并進(jìn)入臨床研究了。 
圖10 沒有查到CD161抗體相關(guān)專利。但是其作為腫瘤治療靶點(diǎn)，已有若干申請，本圖舉例說明。 ? ? ? ?目前，CD161更多的是作為免疫細(xì)胞亞群的標(biāo)記信號，以表征細(xì)胞亞群在不同疾病治療中的變化。 ? ? ? ?CD161/LLT1可能存在成藥的困難。分析原因，可能有： ? ? ? ?1. 阻斷結(jié)果的矛盾：阻斷對于NK細(xì)胞，可以釋放其免疫活性。然而對于T細(xì)胞，結(jié)果則相反，通過LLT1的阻斷實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在CD4+ CD8+的T細(xì)胞中，激活后的T細(xì)胞高表達(dá)CD161。不過，CD161也可能作為負(fù)反饋信號，卻缺少LLT1的結(jié)合，從而不能實(shí)現(xiàn)抑制。這需要調(diào)研相關(guān)病理情況。 ? ? ? ?2. CD161和LLT1的結(jié)合能力較弱：KD約48μM，二元復(fù)合體的穩(wěn)定性不強(qiáng)，阻斷活性不易判斷。參考NKG2A/CD94與HLA組成三元復(fù)合體，該三元復(fù)合體的結(jié)構(gòu)可能更穩(wěn)定，以進(jìn)行拮抗活性抗體的篩選，是值得參考的。 ? ? ? ?3. 結(jié)合表位：LLT1在體內(nèi)受CLEC2D其他變體的干擾，表位難以選定。但是根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，目前已存在的LLT1抗體，可以實(shí)現(xiàn)阻斷LLT1與CD161結(jié)合。 ? ? ? ?而CD161的結(jié)合表位，與N糖修飾關(guān)聯(lián)可能性較大。如果存在靶向的抗體，N糖修飾的個(gè)體差異，可能導(dǎo)致抗體脫靶。另外，RSCB-PDB數(shù)據(jù)庫中已有兩者的結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)，有助于我們預(yù)測復(fù)合體結(jié)合情況，比如https://www.rcsb.org/structure/5MGT（圖11A），https://www.rcsb.org/structure/5MGR（圖11B）?？梢钥吹絅糖修飾在蛋白表位的位置。 A. LLT1胞外域 B. CD161胞外域 圖11 LLT1和CD161胞外域的晶體結(jié)構(gòu)。使用該數(shù)據(jù)，我們可以模擬兩個(gè)分子的結(jié)合。
二、T細(xì)胞：向左，自身免疫；向右，腫瘤 ? ? ? ?CD161在T細(xì)胞，尤其是CD8+的T細(xì)胞的病理機(jī)制，也具有巨大的潛力。 ? ? ? ?有研究發(fā)現(xiàn)，北歐的多發(fā)性硬化癥（MS），與CD161在CD8+CD3+ T細(xì)胞中的異常過表達(dá)有關(guān)，血液中的CD161顯著高于健康人群（圖10）。CD161highCD8+CD3+ T細(xì)胞，伴隨高表達(dá)的IL-17，IL-12介導(dǎo)增殖，釋放IFN-γ。這些IFN-γ可能導(dǎo)致了MS患者大腦中的免疫損傷，以及異常的B細(xì)胞囊泡。 ? ? ? ?之前提到，CD161的表達(dá)與IL-17的分泌有很強(qiáng)的相關(guān)性。IL-17作為信息溝通的橋梁，在T細(xì)胞調(diào)節(jié)的獲得性免疫，以及針對細(xì)胞外的細(xì)菌、真菌的急性炎癥響應(yīng)，起到重要的作用。IL-17是CD3γδ+的T細(xì)胞，或者Th17，或者NKT，產(chǎn)生的效應(yīng)細(xì)胞因子，可激活中性粒細(xì)胞，并將其招募到感染和炎癥的部位。IL-17也是調(diào)節(jié)B細(xì)胞效應(yīng)的細(xì)胞因子，在抗病毒方面有積極作用。 ? ? ? ?通常，我們認(rèn)為MS與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）類似，是一種自身免疫疾病。然而，CD161在其中的表現(xiàn)不同。MS患者中，CD161在CD8+的細(xì)胞毒性體細(xì)胞中，顯著高表達(dá)，而RA患者中，CD161在CD8+的細(xì)胞毒性體細(xì)胞中，顯著低表達(dá)（圖11）。 ? ? ? ?類似的，在克郎氏癥中，也是CD4+的T細(xì)胞中，異常高表達(dá)CD39和CD161。 圖12 CD161在MS患者中的異常高表達(dá)，可被IFN-β治療到低于正常水平。 
圖13 MS和RA中，CD8+或CD4+的T細(xì)胞上，CD161的陽性率近似（A、C）。然而，在CD8+的T細(xì)胞，通常認(rèn)為是細(xì)胞毒性T細(xì)胞上，MS中CD161的表達(dá)顯著更高（B），CD4+的T細(xì)胞差異不大（D）。 ? ? ? ?對肝癌組織及患者的血液樣本的研究，發(fā)現(xiàn)對CD8+PD1+的T細(xì)胞（具有細(xì)胞毒性），CD161+和CD161-的呈現(xiàn)了分布上的顯著差異，而這種差異可能與不同的演化線路有關(guān)。CD161+的T細(xì)胞，在腫瘤組織的比例低于正常組織，但是CD161-的T細(xì)胞降低的比例更高。CD161+的T細(xì)胞，具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性、增殖能力、腫瘤組織浸潤性（圖14）。 ? ? ? ?這也預(yù)示著，激活CD161信號通路，而不是阻斷，可能更有利于抗腫瘤的治療。LLT1對CD161親和力不足，需要親和力更高的多肽、抗體。而激活型多肽、抗體的獲得，往往難于阻斷性抗體。 
圖14 CD161+的T細(xì)胞，不同于CD161-的T細(xì)胞，不依賴于LAG3-MHCII，具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性，增殖能力，以及浸潤腫瘤組織的能力。 
圖15 CD8+CD161+在感染（A）、腫瘤治療（B）、自身免疫（C）相關(guān)的機(jī)制。
三、結(jié)尾 ? ? ? ?CD161作為NK細(xì)胞的靶點(diǎn)，阻斷其與LLT1的結(jié)合，可以提高NK的細(xì)胞毒性。同時(shí)，CD161對細(xì)胞毒性T細(xì)胞的活性、記憶分化有正面作用，阻斷CD161反而減弱了免疫活性，不過，這種阻斷，在治療自身免疫疾病時(shí)，可以起到非常好的效果。因此，選擇CD161/LLT1阻斷型抗體的適應(yīng)癥，需要考慮其免疫系統(tǒng)的細(xì)胞亞群的活性，是否適用于阻斷機(jī)制。 ? ? ? ?然而，根據(jù)clinictrial的搜索結(jié)果，CD161更多的是作為臨床實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞亞群表征的標(biāo)志物，與CD25、CD69、CD56的應(yīng)用比較接近。
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